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外周血单个核细胞内人类免疫缺陷病毒DNA和RNA定量对病毒转录活性的区分
作者: 
单位:132013 吉林市 吉林医药学院药学院1、公共卫生学院3、临床医学部4 150001 哈尔滨市 哈尔滨医科大 学附属第四医院感染科2 518112 深圳市 深圳市第三人民医院感染三科5 130123 长春市 长春市传染病医院艾滋病科6  132002 吉林市 吉林市传染病医院感染科7 361101 厦门市 厦门市第五医院感染科8 150030 哈尔滨市 哈尔滨市第六 医院感染科9 
关键词:人类免疫缺陷病毒 脱氧核糖核酸 核糖核酸 外周血单个核细胞 基因表达谱  录激活 
分类号:
出版年,卷(期):页码:2022,16(3):165-171
摘要:

     【摘要】目的 基于人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HIV-1总DNA和RNA定量检测结果对感染细胞内病毒的转录活性进行区分。方法 采集2017年10月至2018年12月于哈尔滨医科大学附属第四医院感染科就诊的HIV-1感染者血液样本,分离PBMCs细胞,采用PCR荧光探针法对PBMCs细胞内HIV-1 总DNA和RNA进行定量检测,并计算两者比值(Ratio)。根据Ratio值筛选出HIV-1转录活跃组样本和相对非活跃组样本,另外选择健康人PBMCs样本作为对照组。对3组样本进行基因转录组表达谱检测以及人口特征差异性检验,并对基因表达谱检测结果进行主成分分析以验证对3组样本病毒转录活性区分的准确性。结果 从60例感染HIV-1患者的PBMCs样本中筛选出HIV-1转录活跃组样本(10例)和相对非活跃组样本(11例),另外选择6例健康人PBMCs样本作为对照组。其中转录活跃组样本Ratio值为165.2~38.93,平均为(339.27 ±189.68);相对非活跃组Ratio值为4.67~42.39,平均为(17.65 ± 11.78)。转录活跃组和相对非活跃组样本间的CD4+ T细胞计数(P = 0.049)和Ratio值(P < 0.001)差异均具有统计学意义;三组样本年龄(P = 0.989)和性别(P = 0.650)分布差异无统计学意义。对3组样本的PBMCs基因表达谱主成分分析结果显示:对照组与HIV-1感染者(包括转录活跃组和相对非活跃组)间区分明显。转录活跃组和相对非活跃组间有部分样本重合,同时结果也显示当HIV-1感染者的CD4+ T淋巴细胞计数与健康人无显著差异时,其细胞内的基因表达与健康人接近。结论 基于HIV-1 总DNA和RNA定量检测结果及两者间比值可以较好地区分PBMCs内病毒转录活性。HIV-1感染细胞内部病毒的不同转录激活状况可导

致其基因表达谱的异质性。
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