【摘要】目的 探讨血液miRNA-548ah在慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染不同时期的表达，并分析其临床价值。方法 选取2015年1月至2019年1月恩施土家族苗族自治州中心医院收治的108例慢性HBV感染者为研究对象（HBV感染组），根据分期不同将108例患者分为免疫耐受期组（32例）、免疫清除期组（28例）、低复制期组（25例）和再活动期组（23例）；另外选取同期100例健康体检者为对照组。采用采用Exo Quick试剂盒提取血液外泌体，并采用Western blot蛋白质印记法验证外泌体的真实性；采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测血液外泌体中miRNA-548ah水平，并收集其血清HBV DNA和丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平。比较HBV感染组患者和对照组血液外泌体miRNA-548ah差异，并绘制ROC曲线探讨血液外泌体miRNA-548ah在慢性HBV感染不同时期中的应用价值，采用Pearson相关法分析血液外泌体miRNA-548ah与HBV DNA和ALT的关系。结果 蛋白质免疫印迹法检测外泌体表面特异性标志物CD63和Tsg101蛋白阳性，提示外泌体提取成功。HBV感染组和对照组血液外泌体miRNA-548ah水平分别为（3.46 ± 0.83）和（0.72 ± 0.15），差异有统计学意义（t = 32.518、P ＜ 0.001）；ROC曲线分析显示，外泌体miRNA-548ah在慢性HBV感染诊断中具有一定价值（AUC = 0.785、95%CI：0.723～0.877、截断值：1.04、敏感性为84.5%、特异度为82.6%）。免疫耐受期组、免疫清除期组、低复制期组和再活动期组血液外泌体miRNA-548ah分别为（4.18 ±1.34）、（1.41 ± 0.45）、（1.32 ± 0.31）和（1.48 ± 0.42），差异有统计学意义（F = 27.435、P ＜0.001）；其中免疫耐受期组和免疫清除期组患者差异有统计学意义（t = 10.427、P ＜ 0.001），免疫清除期组和低复制期组患者差异无统计学意义（t = 0.838、P = 0.406）；低复制期组和再活动期组差异无统计学意义（t = 1.510、P = 0.138）。Pearson相关分析表明，HBV感染免疫耐受期miRNA-548ah与HBV DNA、ALT均呈显著正相关（r = 0.857、P ＜ 0.001，r = 0.763、P ＜ 0.001）；HBV感染再活动期患者miRNA-548ah与HBV DNA、ALT均呈显著正相关（r = 0.776、P = 0.001，r = 0.711、P = 0.001）；HBV感染免疫清除期miRNA-548ah与HBV DNA、ALT呈正相关，但相关性不显著（r =0.572、P = 0.035，r = 0.531、P = 0.042）；HBV感染低复制期miRNA-548ah与HBV DNA、ALT呈正相关，但相关性不显著（r = 0.541、P = 0.039，r = 0.502、P = 0.048）。结论 血液外泌体miRNA-548ah在慢性HBV感染者高表达，有望成为诊断慢性HBV感染的新型标志物，且其在HBV感染自然史不同阶段的表达存在差异，与血清HBV DNA和ALT亦相关，可用于指导临床用药并进行及时调整。