【摘要】 目的 建立基于TaqMan探针的HIV DNA荧光定量PCR检测方法,并检验其可靠性和稳定性。方法 选择HIV-1的保守区域LTR-gag设计引物和探针,构建质粒标准品,建立检测方法,对12份HIV-1阳性标本和5份HIV-1阴性标本进行检测。将检测结果与罗氏HIV DNA定性检测试剂盒作比较。结果 荧光定量PCR体系的检测下限为50 拷贝/μl,标准曲线的相关系数为0.99,斜率为-1.65,截距为39.80;12份HIV-1阳性标本,检出率为100%;5份HIV-1阴性标本,检测结果均为阴性。且该方法与罗氏HIV DNA定性检测试剂盒检测结果完全一致。采用不同方法提取的DNA再行HIV DNA检测的比较,其差异无统计学意义(t = 0.033、P = 0.974)。结论 成功建立了一种HIV DNA的检测方法,具有快速、特异性强以及稳定性好等优点。
|