【摘要】 目的 探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)体外对耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)耐药性形成及对OprD2基因的影响。方法 本实验设立3个组,实验组为hUCMSCs组,对照组为细胞对照组(即人肺成纤维细胞组,NHLF组)和空白对照组。次抑菌浓度肉汤诱导PA耐药传导过程中,hUCMSCs组和NHLF组分别加入其与PA共培育所得的上清液,空白对照组加入细胞培养液,观察3组诱导耐药所需代数以及抑菌圈的大小。诱导耐药前后分别采用K-B法及real-time PCR法
测定PA对常见抗菌药物的敏感性及OprD2基因的表达量。 结果 经次抑菌浓度的亚胺培南诱导后,hUCMSCs组PA耐药性的出现较NHLF组及空白对照组延迟。NHLF组和空白对照组PA于诱导的第17代出现亚胺培南耐药,而hUCMSCs组PA于第19代出现耐药性。real-time PCR结果显示,诱导耐药后PA中OprD2表达量较诱导前出现减少或消失。其中hUCMSCs组PA OprD2的表达量减少至诱导耐药前的10.96%,而NHLF及空白对照组OprD2无表达,即诱导后出现OprD2基因缺失。 结论 人脐带间充质干细胞具有延迟PA耐药性形成的作用,其机制可能是通过分泌抗菌肽LL-37和人β防御素-2从而抑制OprD2表达的减少,而外膜蛋白OprD2表达量减少或缺失是引起PA对亚胺培南耐药的原因。
|