【摘要】 目的 建立一种快速检测新型隐球菌的方法。方法 根据新型隐球菌的18 S rRNA基因序列设计内外引物各一对，在不同温度下对新型隐球菌进行环介导等温扩增，以探明环介导等温扩增法检测新型隐球菌最适宜的温度。对新型隐球菌、其他几种常见引起脑膜炎的病原菌以及部分种类的念珠菌进行扩增，以研究环介导等温扩增技术检测隐球菌的特异性。将新鲜培养的新型隐球菌稀释后加入非隐球菌感染患者的脑脊液中，模拟脑膜炎感染后的脑脊液环境，以研究环介导等温扩增技术检测新型隐球菌的敏感性。结果 环介导等温扩增法检测新型隐球菌在60 ℃～65 ℃条件下均能实现良好扩增。环介导等温扩增法对其他病原菌的检测结果均为阴性，仅新型隐球菌的检测结果为阳性，特异性达到100%。用环介导等温扩增法从脑脊液中检测新型隐球菌的最低检出限为102 CFU/ml。用环介导等温扩增技术检测新型隐球菌性脑膜炎，能节省培养及传统鉴定的时间，从DNA的提取至反应结束在2～3 h内即可完成，大大减少了诊断所需时间。结论 环介导等温扩增是一种灵敏度高，特异性强，耗时短，且操作简便的检测新型隐球菌感染的方法。