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HCV NS3对IFN-λⅠ表达的影响及其调控机制研究
作者:高萍   董金玲   刘顺爱   王琦   张锦前   成军 
单位:00015 北京 首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所 新发突发传染病研究北京市重点实验室 
关键词:肝炎病毒 丙型 NS3基因 干扰素-λⅠ 调控 
分类号:NUll
出版年,卷(期):页码:2013,7(1):1-4
摘要:

    【摘要】 目的  探讨丙型肝炎病毒(HCV)NS3对Interferon-λⅠ(IFN-λⅠ/IL-29)表达的影响及其调控机制。 方法  将HCV NS3表达载体pcDNA3.1/myc-His-NS3转染至HepG2细胞,验证HCV NS3蛋白表达之后,采用实时荧光定量PCR、Western blot 和ELISA法观察HCV NS3对IFN-λⅠmRNA及其蛋白水平表达的影响。构建IFN-λⅠ全长启动子报告基因表达载体和3’-非翻译区(3’-UTR)报告基因表达载体,借助双萤光素酶活性检测,探索HCV NS3对IFN-λⅠ转录水平的调控机制。 结果  pcDNA3.1/myc-His-NS3在HepG2细胞中成功表达,与转染pcDNA3.1/myc-His空载体相比,pcDNA3.1/myc-His-NS3过表达时在mRNA和蛋白水平均能抑制HepG2细胞内IFN-λⅠ的表达,具有统计学意义(P< 0.05)。双萤光素酶活性检测结果显示,转染IFN-λⅠ全长启动子和3’-非翻译区报告基因表达质粒后,与对照组相比,双萤光素酶活性变化无统计学意义(P> 0.05)。结论 HCV NS3在mRNA及蛋白水平能抑制IFN-λⅠ表达,但转录水平不受影响,其具体调控机制有待进一步研究。

基金项目:
国家“十二五”传染病重大专项(No. 2012ZX10002003);北京市科委重大项目(No. D09050703560908);北京市卫生系统高层次卫生技术人才“领军人才”项目(No. 2009-1-09)
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