【摘要】 目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)NS3对Interferon-λⅠ(IFN-λⅠ/IL-29)表达的影响及其调控机制。 方法 将HCV NS3表达载体pcDNA3.1/myc-His-NS3转染至HepG2细胞,验证HCV NS3蛋白表达之后,采用实时荧光定量PCR、Western blot 和ELISA法观察HCV NS3对IFN-λⅠmRNA及其蛋白水平表达的影响。构建IFN-λⅠ全长启动子报告基因表达载体和3’-非翻译区(3’-UTR)报告基因表达载体,借助双萤光素酶活性检测,探索HCV NS3对IFN-λⅠ转录水平的调控机制。 结果 pcDNA3.1/myc-His-NS3在HepG2细胞中成功表达,与转染pcDNA3.1/myc-His空载体相比,pcDNA3.1/myc-His-NS3过表达时在mRNA和蛋白水平均能抑制HepG2细胞内IFN-λⅠ的表达,具有统计学意义(P< 0.05)。双萤光素酶活性检测结果显示,转染IFN-λⅠ全长启动子和3’-非翻译区报告基因表达质粒后,与对照组相比,双萤光素酶活性变化无统计学意义(P> 0.05)。结论 HCV NS3在mRNA及蛋白水平能抑制IFN-λⅠ表达,但转录水平不受影响,其具体调控机制有待进一步研究。
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