【摘要】目的 建立检测人颗粒溶素(GNLY)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定肺结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因在肺结核病患者PBMC中的表达及其临床意义。方法 应用已构建的质粒PGEM-T/GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定122例肺结核患者,其中包括痰结核分枝杆菌阳性者62例(菌阳组),痰结核分枝杆菌阴性者60例(菌阴组)及40例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量,并分析菌阳组抗结核治疗前后GNLY基因表达水平的变化。结果 肺结核患者PBMC GNLY基因表达水平显著低于对照组(P < 0.01);治疗前菌阳组PBMC GNLY基因表达水平显著低于菌阴组(P < 0.05);治疗后菌阳组PBMC GNLY基因表达水平显著升高(P <0.05)。结论 本研究成功建立了检测人GNLY基因表达含量的荧光定量RT-PCR方法,GNLY基因表达水平可作为肺结核的疗效观察及预后判断的一个新的实验室指标。
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