【摘要】　目的　应用酵母双杂交技术及生物信息学技术筛选乙型肝炎病毒x抗原结合蛋白1（HBXBP1）并进行克隆，诱导其在大肠埃希菌BL21中表达及亚细胞定位。方法　应用反转录PCR（RT-PCR）技术，以HepG2细胞mRNA为模板，扩增获得HBXBP1基因片段，连接到pGEM-T载体，双酶切鉴定及测序正确后克隆至原核表达载体pET-32a（+）中，转化大肠埃希菌BL21，IPTG诱导表达以获得HBXBP1融合蛋白，并通过SDS-PAGE及Western blot分析证实融合蛋白的特异性；构建HBXBP1基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1-HBXBP1，转染HepG2细胞，24 h后荧光显微镜下观察表达蛋白的亚细胞定位。结果　RT-PCR扩增获得921 bp的HBXBP1基因片段，插入至原核表达载体pET-32a（+）中，转化大肠埃希菌BL21，经IPTG诱导后，成功获得约56 kD的重组蛋白，经Western blot证实其具有良好的特异性；成功构建出HBXBP1基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1- HBXBP1，其表达的蛋白定位于细胞质。结论　构建了pET-32a（+）-HBXBP1原核表达载体，并在大肠埃希菌BL21中诱导表达了HBXBP1融合蛋白；HBXBP1基因可表达HBXBP1蛋白且定位于细胞质，为研究HBXBP1蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了一定的基础。