【摘要】  目的 　研究马尔尼菲青霉菌（PM）溶血磷脂酶（LysoPLs）基因的克隆、表达和纯化，为研究其致病功能奠定基础。方法  用生物信息学方法，从PM酵母相全长 cDNA 文库中识别出PMLysoPLs基因的同源序列及其全长编码区。通过PCR方法扩增PMLysoPLs基因的编码区序列，构建原核表达载体pET 30a（+）-PMLysoPLs，经DNA 序列测定证实其序列正确，在大肠埃希菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达，重组产物用His-镍蛋白纯化柱进行纯化。结果  PMLysoPLs基因长度为991 bp，其全长编码序列长度为732 bp，编码243个氨基酸，其编码蛋白理论分子量为26.8 kDa。重组表达载体经序列测定及酶切鉴定与理论推测结果相符。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，该基因在BL-21/DE3大肠埃希菌中得到高效的可溶性上清表达，纯化后的重组蛋白分子量25~35 kDa，其单一蛋白纯度可达95 %以上。结论 　本研究成功构建了PMLysoPLs基因的ρET 30a（+）原核重组质粒，获得的可溶性重组蛋白表达效率高，可用于进一步研究PM溶血磷脂酶的功能。