目的  研究乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原基因启动子Ⅱ（SPⅡ）与肝细胞蛋白——尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶4（NADHDH4）结合机制及其调节功能。方法  应用聚合酶链反应（PCR）技术，参照HBV ayw基因序列与NADHDH4 cDNA序列全编码区设计相应引物，以pCP10质粒及肝母细胞瘤细胞系HepG2基因组DNA为模板，扩增SPⅡ和NADHDH4的DNA片段，将其分别克隆至pCAT3及pcDNA3.1（－）中，构建pCAT3-SPⅡ报告基因表达载体和pcDNA3.1（－）-NADHDH4真核表达载体，以其质粒共转染HepG2细胞。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测pCAT3-SPⅡ报告基因表达载体对pcDNA3.1（－）-NADHDH4真核表达载体的调节活性。结果  成功构建了pCAT3-SPⅡ报告基因表达载体和pcDNA3.1（－）-NADHDH4真核表达载体，pCAT3-SPⅡ实验组酶表达为pCAT3的2.8倍，而pcDNA3.1（－）-NADHDH4 + pCAT3-SPⅡ实验组酶表达约为pCAT3-SPⅡ的5倍，结果显示NADHDH4对HBV SPⅡ具有上调作用。结论  共转染实验证实了NADHDH4对SPⅡ有明显的上调作用，为进一步阐明乙型肝炎病毒致病的分子生物学作用机制奠定了基础。