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人肝细胞生长因子转染L02细胞的锌指基因差异表达筛选
作者: style="FONT-SIZE: 9pt">吴亮   张锦前   王琦   张晨宇   王晓春   洪源   曾辉   成军 
单位:首都医科大学附属北京地坛医院 内三科 传染病研究所 北京 100015 
关键词:人肝细胞生长因子  L02细胞  锌指基因 
分类号:NULL
出版年,卷(期):页码:2010,4(4):383-389
摘要:

目的  构建hHGF真核表达载体,在L02细胞中表达hHGF并筛选其中的差异表达基因。方法  构建pcDNA3.1(-)-hHGF载体,测序鉴定;其转染L02细胞后进行蛋白免疫印迹检测;将pcDNA3.1(-)-hHGFpcDNA3.1(-)载体分别转染L02细胞后,提取总mRNA并逆转录为cDNA,运用基因表达谱芯片技术分析差异表达基因。结果  构建的hHGF真核表达载体pcDNA3.1(-)-hHGF经酶切和测序鉴定正确;转染L02细胞后经蛋白免疫印迹证实hHGF存在明确表达;pcDNA3.1(-)及pcDNA3.1(-)-hHGF分别转染L02细胞后提取总RNA,经基因表达谱芯片分析发现,表达水平显著上调和下调的基因分别有404个和145个,在表达显著上调的基因中包含7种锌指基因。结论  筛选出了hHGF转染L02细胞后的差异表达基因,为其作用机制及与锌指蛋白相关性的研究提供了重要依据。

基金项目:
A国家自然科学基金 30600524 ; A北京市卫生局项目 2004-局-051
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